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摘要：为研商保健食物的润肠通便功效，针对保健食物润肠通便功效试验的央浼，用10 mg/kg BW的复方地芬诺酯设立了平静的小鼠便秘模子，模子组与比较组正在首粒黑便排便岁月、6 h内排便粒数及排便重量间均有明显性分歧(P＜0.05)。众次反复实习标明，该模子平静牢靠，发起正在保健食物润肠通便功效检测中对其举行验证。
保健食物润肠通便功效检修中，便秘动物模子的操纵应试虑差异保健食物的特质，目前公认的具有润肠通便功效的保健食物有药食同源类中药制剂、纤维素类、活菌制剂及双歧因子等产物。因为保健食物中药制剂含量不行过高，药效评判中操纵的小鼠便秘模子不适合保健食物的功效检测, 咱们针对保健食物润肠通便功效检测的小鼠便秘模子举行了研商，提出了保健食物润肠通便功效检修中设立小鼠便秘模子的一种本事。
制模子药物复方地芬诺酯片，为止泻药，每片含复方地芬诺酯2.5 mg，由江苏国营武进制药厂创制（苏卫药准字82-2464-1号），人体操纵剂量为一日3～4次，每次1～2片，即人体逐日推选操纵剂量为0.125～0.333 mg/Kg BW。
因为种属合连，按人体逐日最大推选量0.333 mg/kg BW计，小鼠逐日等效感化量为3.3 mg/kg BW。
实习动物中国医学科学院肿瘤研商所实习动物核心供给的二级昆明种强健雄性小鼠(照准号为京动字8910M050)，体重20～23 g。
试剂墨汁的配制：无误称取阿拉伯树胶100 g，加水800 mL，煮沸至溶液透后，称取活性碳（粉状）50 g加至上述溶液中煮沸3次，待溶液凉后加水定容到1 000 mL。复方地芬诺酯混悬液的配制：取复方地芬诺酯片，用研钵研碎后加水配制成所需浓度的复方地芬诺酯混悬液。
1.2.1复方地芬诺酯药物制模剂量的筛选按保健食物润肠通便功效检测推选本事举行。小鼠50只，随机分为5组，每组10只，个中1组为比较组，4组为实习组。实习前24 h停食给水。实习组复方地芬诺酯给药量折柳为：50、25、10和5 mg/kg BW（折柳相当于复方地芬诺酯人体最大推选操纵量的150倍、75倍、30倍、15倍），比较组小鼠用水灌胃。灌胃后动物均单笼喂养，寻常饮食进水。考察小鼠首粒排便岁月、12 h内排便粒数和排便重量。
1.2.2墨汁和差异剂量复方地芬诺酯配合操纵对小鼠排便的影响依据1.2.1试验结果，鉴于润肠通便保健食物的感化对比温和，策画如下试验：
取小鼠40只，随机分为4组，每组10只，折柳为摄入复方地芬诺酯10、5和3.3 mg/kg BW组和空缺比较组，实习组以相应剂量的复方地芬诺酯灌胃，比较组给水，30 min后，各组小鼠均以墨汁灌胃（首粒粪便指示剂），从给墨汁下手记载小鼠首粒黑便的排出岁月和差异时段内的排便粒数。
1.2.310 mg/kg BW复方地芬诺酯和墨汁设立的小鼠便秘模子排便的动态考察依据1.2.2的试验结果，对摄入复方地芬诺酯10 mg/kg BW组小鼠举行了进一步试验。
取小鼠20只，随机分为2组，每组10只，折柳设为复方地芬诺酯10 mg/kg BW组和空缺比较组，试验前24 h停食给水。试验组以复方地芬诺酯灌胃，比较组给水，30 min后两组小鼠折柳以墨汁灌胃，从给墨汁下手记载首粒黑便的排出岁月、差异岁月段的排便粒数。
从表1可能看出，(1)复方地芬诺酯的给药量与药效感化间存正在显明的剂量—反映合连：跟着复方地芬诺酯用量的增添，小鼠首粒排便岁月拉长，12h内排便粒数和排便重量淘汰，其相干系数折柳为0.9609、－0.9998和－0.9758。（2）当复方地芬诺酯用量为5 mg/kg BW时，实习组小鼠的首粒排便岁月与比较组对比映现极明显性分歧 (P<0.01)，但12h内排便粒数和排便重量无明显性分歧 (P＞0.05)；当复方地芬诺酯用量为10 mg/kg BW时，实习组与比较组小鼠的首粒排便岁月对比分歧极明显(P＜0.01)，12 h内排便粒数也映现了明显性分歧 (P＜0.05)，但12 h内排便重量仍无显明分歧(P＞0.05)，这诠释5 mg/kg BW和10 mg/kg BW复方地芬诺酯的有用药理感化不行连接12 h。（3）当复方地芬诺酯用量为25 mg/kg BW时，实习组小鼠的首粒排便岁月、12 h排便粒数和排便重量与比较组对比均映现极明显性分歧 (P＜0.01)，即25 mg/kg BW复方地芬诺酯的有用药理感化能连接12h。（4）粪便重量与排便粒数比为不敏锐目标，这重要是由于粪便每每与水、尿和饲料殽杂正在一同，影响实习结果。
正在实习中出现，当复方地芬诺酯用量为50 mg/kg BW时，片面小鼠12 h无粪便排出，剖解出现其膀胱太甚充沛, 从结果可能看出, 50 mg/kg BW复方地芬诺酯模子组与比较组首粒排便岁月折柳是344 min和22 min,这或者是复方地芬诺酯太甚贬抑光滑肌的结果。通过众次试验出现，此毒性感化发作率为10%～20%。
因为禁食小鼠食用垫料，使胃肠道内有残留粪便，以致首粒排便岁月难以代表便秘模子小鼠的肠蠢动状况，商讨选用妥当的首粒粪便指示物——墨汁。
由表2可睹，(1)小鼠的首便岁月、排便粒数和排便重量与复方地芬诺酯用量间存正在显明的剂量反映合连：当复方地芬诺酯用量为3.3 mg/kg BW时，首粒排便岁月与比较组对比即映现极明显性分歧（P＜0.01），跟着复方地芬诺酯用量的增添，首粒排便岁月正在络续增添。(2)3.3 mg/kg BW和5 mg/kg BW复方地芬诺酯的有用药理感化岁月均不敷6 h, 超出药效感化后的一段岁月内, 排便粒数将代偿性增添以使制模组与比较组的排便粒数无明显性分歧。（3）10 mg/kg BW复方地芬诺酯组的有用药理感化岁月正在6 h以上。
鉴于以上身分，为了让保健食物较温和的感化得以呈现，咱们以为25 mg/kg BW 和 50 mg/kg BW复方地芬诺酯举动制模剂量不适于保健食物功效检测，采选10 mg/kg BW复方地芬诺酯举动制模剂量考察6 h较为适宜。
3.310 mg/kg BW复方地芬诺酯和墨汁设立的小鼠便秘模子排便的动态考察实习结果睹表3。
动物数 首粒黑便排出岁月 min 6 h内排便粒数 7～12 h排便粒数 12 h内排便粒数
由表3可睹，（1）模子组小鼠首粒排便岁月与比较组对比有极明显性分歧(P＜0.01)。（2）由图1可能看出，跟着考察岁月的拉长，模子组与比较组小鼠每小时排便粒数络续逼近。正在5～6 h间模子组与比较组的排便粒数根本相称，而正在6～7 h间模子组小鼠的排便粒数略高于比较组，正在7～12 h间比较组与实习组对比，排便粒数无明显性分歧。这诠释当小鼠摄入复方地芬诺酯6 h后，药物已根本不起感化，故此发起用10 mg/kg BW复方地芬诺酯设立的小鼠便秘模子正在检测保健食物时应考察6 h。（3）用墨汁作指示物使首粒排便岁月可能明晰界定，清扫了小鼠肠道内残留粪便的作对，这也使得比较组小鼠的首粒排便岁月较不给墨汁比较组小鼠有显明的拉长。
通过以上实习可能看出用10 mg/kg BW复方地芬诺酯和墨汁设立的小鼠便秘模子是平静牢靠的，与50 mg/kg BW 设立的动物模子比拟，这一动物模子不只适合保健食物润肠通便温和的感化，墨汁的援用更使模子的敏锐度、无误度有所升高, 同时大大淘汰了试验的考察岁月，发起正在保健食物润肠通便功效检测中对其举行验证。
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