单元：于龙顺潭艳任世兰赵国举郧阳医学院药理教研室；赵442000湖北十堰 郧阳医学院探究生班学员，现东汽花果病院儿科；
摘要方针探究脑缺血复灌后继续行使GM1对改正回忆抨击的疗效。手段采用小鼠夹闭双侧颈总动脉的脑短暂缺血复灌模子，缺血15min后复灌起源即继续赐与GM1，7d后举行开场举止、克制性回避反响及Y-水迷宫试验，检测动物举止及认知效力，然后脑片阅览海马CA1区锥体细胞密度。结果GM1组(10mg/kg.d,共7d)；克制性回避反响经初次操练后24h再次检测,差错次数明白裁汰(从2.1±1.14到0.7±0.46)，Y-水迷宫试验精确次数明白填补(从0.7±0.9到1.5±1.0)，而比照组两次检测结果均无明显差别。脑片阅览GM1明白克制脑缺血复灌后迟发性神经元仙游，GA1区锥体细胞数为78±15/mm，明显高于比照组(53±6.1/mm)。结论复灌起源后继续行使GM1诊疗对脑缺血酿成的回忆抨击有明白改正用意，这或者与其裁汰迟发性神经元仙游相合。
神经节苷脂对神经元有养分及鼓动突起发展用意，外源性的GM1能通过血脑障蔽并嵌入神经浆膜［1］，为脑扞卫剂。实习探究表明神经节苷脂可有用地改正众种外周及中枢神经编制毁伤，诱导神经再生［2］。对缺血性脑损害众以为有肯定扞卫用意，但也有不少抵触的报道，Simon等以为或者用药的时期窗题目是来源之一，正在大脑中动脉塞栓模子，GM1应正在梗死前或梗死后5min把握赐与有用［3］。对临床用药而言，缺血复灌后用药的诊疗用意似更蓄志义，于是咱们采用小鼠双侧颈总动脉夹闭短暂缺血复灌模子，阅览正在脑缺血复灌后GM1继续赐与对小鼠身体情况，举止体现，回忆抨击及迟发性神经元仙游等的影响，以进一步探究脑缺血复灌后行使GM1的诊疗价格。
实习选用昆明品系小鼠35只，体重SD 21.0±2.5g，牝牡兼用，分笼惯例喂养，随机分为4组，即假手术组、比照组、GM1组及尼莫地平组。
乌拉坦1.2g/kg腹腔打针麻醉，袒露双侧颈总动脉，离散迷走神经，用无创伤性血管夹夹闭颈总动脉，陆续15min后复灌。假手术组仅举行离散血管手术，比照组夹闭及复灌后腹腔打针NS 0.1ml/10g.d，GM1组腹腔打针 GM1(巴西TRB Pharma)10mg/kg.d，尼莫地平组腹腔打针尼莫地平(Nimodipine,Nim,天津百姓制药厂)20mg/kg.d，均继续用药7d，然后采用开场举止，克制性回避反响及Y水迷宫试验举行初次操练试验，24h后再反复检测回忆依旧，以明晰动物举止及认知效力的变革，落成以上检测后断头取脑，胸腺及脾脏称重，脑固定切片染色作样式学检验。
2.1机体寻常变革(表1)缺血复灌7d后体重与缺血前斗劲，各组均有所下降，以比照组下降较众(-13%)，GM1组较少(-7.8%)，胸腺重量比照组最小，明白小于假手术组，(P<0.05)，脾脏重量以GM1组最大，与假手术组斗劲差别很是明显(P <0.01)，结果提示脑缺血复灌对中枢的毁伤还或者影响机体的发展发育，给药组均有肯定的扞卫用意。
2.2.1开场举止参考Crine等手段［4］纪录小鼠正在3min内穿越格数，扶壁直立次数，理毛次数及粪便粒数等，斗劲初次检测与24h后反复检测的变革。穿越格数，反复检测均低于初次检测，但以比照组减低较少(约20%)，GM1裁汰约33%，Nim组裁汰明显约61%，扶壁直立次数也以Nim组裁汰最明显 (由11±6.7～2.0±1.1)。
2.2.2克制性回避反响克制性回避以反响箱，明晰暗两室，有小门相通，小鼠放入明室，当进入暗室5秒后通电击(35V，AC)，纪录3min内进入暗室次数(差错次数)。初次检测与再次检测结果组内配对t检测，假手术组、GM1组，Nim组正在24h后再次检测的差错次数明白少于初次，两者差别均很是明显(P<0.01)，比照组两者则无明白差别(表2)。
2.2.3水迷宫试验用小鼠Y-型水迷宫，水温25±1℃，术后7d初次操练，每鼠继续测3次，每次间止息1min，以10秒内抵达坪台为精确，计录精确次数，24h后再继续举行3次检测。结果睹表3，组内配对t检讨，假手术组和GM1组再次检测精确次数均明白众于初次，永别P<0.01和P<0.05，比照组无明白差别。
2.3海马CA1区锥体细胞密度的变革术后7d小鼠认知效力检测落成后，取脑，惯例石腊切片，选用海马区段脑继续冠状切4μm,厚片，HE染色，光镜阅览计数海马CA1区锥体细胞，集合筹划图像阐述管制。结果睹表4，假手术组、GM1组、Nim组海马CA1区锥体细胞密度均明显高于比照组。
本实习采用无创伤性血管夹夹闭双侧颈总动脉(阻断血流牢靠，大鼠四血管窒塞前脑缺血模子已表明［5］)，阅览发掘假如麻醉深度得当，手术时动物和平，且夹闭动脉阻断血流时不酿成血管过分牵拉以至浮现反射性心克制，小鼠众不至很速仙游。为阅览脑缺血复灌后GM1诊疗用意，咱们选取缺血15min后复灌起源时给药，并继续用药7d的诊疗计划。探究显示比照组动物对克制性回避反响和水迷宫试验，初次操练与24h后再次检测结果均无明白差别，证实小鼠回忆依旧受损，有回忆抨击。GM1组与假手术组相同，24h后检测结果明白优于初次操练收效，提示回忆依旧较好。海马CA1区锥体细胞密度检测结果与举止检测结果相同，比照组CA1区锥体细胞损失较众，假手术组和GM1组细胞密度均明白高于比照组，GM1组细胞数目比假手术组有所裁汰，但无明显差别。这些结果分析脑缺血后陆续行使GM1诊疗可改正缺血复灌所致回忆抨击且裁汰迟发性神经元仙游，也提示不但正在缺血前或缺血早期给药［3］，便是正在缺血15min后复灌起源时行使GM1继续诊疗也可发作扞卫用意。
脑缺血时早期赐与GM1可克制兴奋性氨基酸及细胞内Ca2+秤谌的增高，活化膜上Ca2+-ATP酶［6］克制缺血时Na+-K+-ATP酶的活性［7］，预防胞内Ca2+陆续堆集，这是GM1抗脑缺血损害的要紧扞卫机制之一。正在缺血后继续行使裁汰易受损区迟发性神经元仙游，改正回忆抨击，这还或者与外源性GM1嵌入神经元膜内［1］，为胞膜卵白供应有益的微处境，庇护了膜机合的完好，强化了内源性神经养分因子的用意及其自己也具有养分用意。
脑缺血复灌后的影响不但包罗中枢神经部门，比照组体重下降，胸腺反复明白裁汰，分析还或者影响机体和发展发育。GM1组体重下降较少，胸腺重量与假手术组无明白差异，但脾脏重量增大明显，GM1是否影响免疫效力值得进一步探究。(本探究的切片制制与图像阐述获得从属病院病理科易筑华主任与学院病理室候襄河师长援手助助，正在此一并称谢)。
5 代荣晓，赵国举，王星文，等.急性反复性前脑缺血再灌注对大鼠皮层电图的影响.郧阳医学院学报，1997，16(4)：191.
7 陈嘉峰，秦震.神经节苷脂GM1对应激性高血压大鼠MCAO后脑结构内Na+-K+-ATPase 活性变革的影响.中风与神经疾病杂志，1996，13(2)：65.
1.本文系本网编辑转载，转载方针正在于传达更众音信，并不代表本网赞许其主见和对其线.如涉及作品实质、版权和其它题目，请正在30日内与本网接洽，咱们将正在第暂时间删除实质或供应稿费！
一、请依照中华百姓共和国相合执法规则、《天下人大常委会合于庇护互联网安静的决断》及《互联网讯息音信办事处分章程》。