用RT-PCR方法定量检测中枢学习记忆功能有关基因的表达


近年来跟着分子生物学及生物化学的飞速发扬及其向神尽心理等学科的排泄,豪爽商酌开头讲明中枢练习追念进程受基因调控。已涌现众种基因及其产品与中枢练习追念的心理进程存正在亲热的干系,如糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、bcl-2、c-fos、神经细胞粘附分子(NCAM)等介入了练习追念的心理进程,正在练习追念进程中发轫要的效用<SUP>[1~7]</SUP>。目前惯例检测中枢练习追念效用相闭基因表达的技巧有免疫组化技巧和核酸杂交技巧。这些技巧往往机警度低、易导致假阳性, 费时费劲。<BR>本文愚弄逆转录召集酶链反响(RT-PCR)与图像认识相团结的技巧定量检测了迅速老化模子小鼠(senescence accelerated mouse,SAM)海马和皮层内练习追念效用相闭基因表达水准的蜕变, 别的还对该技巧的可行性作了考虑。

用RT-PCR定量检测脑内练习追念效用相闭基因的表达机警度高、特异性好、简易迅速, 越发适合于检测微量样品和表达水准很低的基因。本尝试挑选了正在大无数细胞内均为高表达的β-actin举动比较, 避免了很众身分的滋扰, 使测定的结果精确、牢靠。<BR>目前以为海马是脑内与练习追念效用干系最为亲热的部位。正在AD等神经退行性疾病患者的脑内,都存正在急急的海马性能贫穷,其海马的毁伤水平与其练习追念效用的没落有显着的闭系性<SUP>[11,12]</SUP>,证实海马性能贫穷同AD的认知效用没落具有亲热的干系。SAMP8是SAM的亚系之一,有犹如于AD的某些特色,其超过的特色是正在增龄进程中,中枢练习追念效用显着没落,到11月龄时中枢练习追念效用已受到显着的损害<SUP>[13~16]</SUP>。RT-PCR检测结果讲明, 与同龄SAMR1比较组比拟,11月龄SAMP8海马GR和MR的表达水准显着低落、bcl-2的表达水准升高,反响了中枢练习追念效用没落的趋向。GR和MR与练习追念效用亲热闭系。GR正在追念的变成和取得进程中发轫要效用,而MR则与追念的连结亲热闭系<SUP>[17,18]</SUP>。运用GR、MR拮抗剂,小鼠的练习追念才干受到显着的损害<SUP>[19]</SUP>,这与本尝试的结果相相仿。举动一个抗凋亡基因,bcl-2大概通过阻断神经细胞的毁伤与遗失而影响练习追念效用<SUP>[20]</SUP>。本尝试中bcl-2表达水准的升高是一种神经元受毁伤、脑老化后的代偿性升高。咱们的尝试证实RT-PCR是一种较好的定量检测脑内练习追念效用相闭基因表达水准的技巧。别的,本尝试也为扶植定量检测脑内微量样品中其它基因的表达奠定了根源。</FONT>

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2022-05-29 19:00:55