目标侦查黄芪提取物对免疫制止小鼠进修影象及免疫效力的影响。方式采用小鼠跳台法测定进修影象效力；采用吞噬鸡红细胞法检测腹腔巨噬细胞的吞噬效力；采用3H-TdR掺入法测定外周血T淋巴细胞增殖反映；采用ELISA法测定血中IFN-γ含量。结果黄芪提取物（25,50 mg.kg-1，ig,21 d）能改进CTX下降的小鼠进修影象效力，同时能普及下降的单核细胞吞噬本事、T淋巴细胞增殖反映以及血中IFN-γ含量。结论黄芪提取物可改进小鼠进修影象效力和具有免疫医治感化。
黄芪行为补气药，行使汗青好久，其单体具有免疫医治、抗炎、镇痛等众方面的药理感化[1～3]。黄芪提取物（extracts of astralus,EA）是从中药黄芪中提取的有用因素，本查究旨正在侦查EA对免疫制止小鼠进修影象及免疫效力的影响。
1.2动物C57BL/6J小鼠，体重(21±2)g，♀♂兼用，购自安徽医科大学尝试核心，动物及格证：皖医实动准字第01号。
1.3仪器CO2造就箱:重庆试验摆设厂出产；FJ-2107型液闪仪，西安262厂产物；Backman Accu-Prep TM System 222A稀释进样仪:日本东芝公司产物；3022型ELISA读数仪:南京华东电子管厂出产；小鼠跳台测定安装由浙江宁海白石药检仪器厂出产的声-光-电单向穿梭箱改装而成。
将C57BL/6J小鼠随机分为阴性比照、病理模子及黄芪提取物用药组（25 mg.kg－1及50 mg.kg－1）4组，每组25只，共计100只。黄芪提取物ig给药，gd×21 d；实验前7 d，小鼠每天sc CTX60 mg.kg－1（阴性比照组sc等容量心理盐水），共3 d。结果一次给药后1 h，采用跳台法对小鼠实行熬炼，24 h后再实行实验。实验已矣后，小鼠眼球取血抗凝供测定外周血T淋巴细胞增殖反映及其IFN-γ含量测定。然后正法小鼠，摘取脾及胸腺，称重后估量脏器系数。另一批小鼠跳台实验已矣后用于测定腹腔巨噬细胞的效力。
2.1小鼠进修影象效力测定采用小鼠跳台法[4]。熬炼时，将小鼠置反射箱内适合5 min后，轻放于平台上，并记实小鼠停滞正在平台上的潜匿期(step-down latency, SDL)。小鼠从平台上跳下，手脚接触铜栅时，顿时赐与电刺激（40 V），记实小鼠遁避至台上的潜匿期（escape latency，EL），同时记实5 min内小鼠从台上跳下的触电次数（即舛误次数）。抉择SDL和EL正在2～60 s的小鼠，于熬炼后24 h实行实验，永别记实3 min内小鼠的跳台舛误次数、SDL及EL。实验时，若小鼠停滞正在台上越过3 min时，将其取下放入箱内一角，尾对平台，赐与电刺激，并记实EL。
2.2小鼠腹腔巨噬细胞吞噬效力测定[5]小鼠跳台实验已矣后，每鼠ip 5％鸡红细胞（CRBC）0.5 ml，12 h后，脱臼正法小鼠，剪开腹壁皮肤，ip Hanks液2 ml，轻揉小鼠腹部，吸收腹腔冲洗液，滴片，晾干后，Giemsa-wright染色，油镜侦查。计数100个巨噬细胞，并按下式估量：吞噬百分率=吞噬CRBC的巨噬细胞数/100个巨噬细胞×100％。
2.3小鼠外周血T淋巴细胞增殖反映测定采用3H-TdR掺入法[6]。小鼠取血后，用淋巴细胞分层液制备单个核细胞，以RPMI-1640造就液制备外周血淋巴细胞悬液（1×106.ml－1）。正在40孔造就板上，每孔永别参预200 μl细胞悬液及Con A，终浓度50 μg.ml－1，置37 ℃，5％ CO2造就箱中造就72 h，于造就终止前6 h均值，加3H-TdR，每孔加10 μl相当于0.5 μCi。连续造就至72 h后，网罗细胞用液闪仪测定放射性，并以cpm均值呈现结果。
2.4小鼠血中IFN-γ含量测定服从试剂盒操作方式实行。永别吸收圭臬品及样品100 μl参预包被板孔内，37 ℃孵育2 h，然后倾去孔内液体，洗涤孔板4次，每孔参预100 μl生物素标识的抗IFN-γ抗体，混匀，37 ℃孵育40 min，再次倾去孔内液体及洗涤孔板；每孔参预任务浓度的streptravidin- HPR，37 ℃孵育40 min，并于结果一次倾去孔内液体及洗涤孔板后，每孔参预100 μl底物TMB，室温暗处安排30 min，于450 nm处用ELISA读数仪测定OD值，并遵循圭臬弧线估量IFN-γ含量。
3.1对CTX致进修影象窒塞小鼠的影响与阴性比照组比拟，CTX组小鼠熬炼和实验时跳台舛误次数光鲜增加，实验时SDL缩短，而EL延伸，分析CTX可致C57BL/6J 小鼠进修影象窒塞。两个剂量黄芪提取物对进修影象均有改进感化，展现为跳台舛误次数删除，SDL延伸及EL缩短，睹表1。
3.2对CTX致免疫效力低下小鼠的影响与阴性比照组比拟较，CTX组小鼠的脾、胸腺重量降落；腹腔巨噬细胞的吞噬百分率、外周血T淋巴细胞增殖反映及IFN-γ含量下降。两种剂量黄芪提取物对各项免疫目标均有水准分歧的改进感化，不但可普及脾、胸腺重量及巨噬细胞的吞噬百分率，并且可使小鼠外周血下降的T淋巴细胞增殖反映及IFN-γ含量光鲜升高，区别有明显性，睹表2、表3。
衰老历程与免疫体例的合连已越来越受到人们的着重。免疫体例不但是机体对内、外处境蜕化的适合和反映体例，并且与机体的老化历程亲昵联系，免疫效力的下降或失调均可加快机体的衰老。衰老历程发作时，免疫效力可逐步显露减退或失调，尤以细胞免疫效力的下降显露早且展现超越。
家喻户晓，CTX可光鲜制止机体的免疫效力，常用于变成免疫效力低下动物模子。而咱们的查究着眼点正在于用CTX惹起免疫制止的同时，侦查小鼠的进修影象本事有何更动。结果展现适量CTX的行使可同时影响免疫效力及进修影象本事，并变成免疫效力窒塞及进修影象窒塞。黄芪提取物对CTX惹起的进修影象窒塞及免疫效力低下有光鲜的改进感化，可分歧水准地改良CTX所致的小鼠进修影象窒塞，使免疫器官重量上升，免疫效力普及，血中IFN-γ含量普及，提示黄芪提取物具有改进进修影象效力和医治免疫效力的感化。
1，李卫平，周爱武，郑亦文，等. 88016的免疫医治感化. 新药查究基金会报，1993；3：83
2，李卫平，王斌，陈敏珠，等. 88016对大鼠腹腔巨噬细胞发作过氧化氢的医治感化.新药查究基金会报，1993；3：77
3，王斌，郑芙林，周爱武，等. 88016的抗炎和镇痛感化.新药查究基金会报，1993；3：95
4，徐叔云，卞如濂，陈修，主编.药理尝试方式学.第2版.北京：国民卫生出书社，1991：659
6，中华国民共和国卫生部药政局编. 免疫医治药. 睹：新药（西药）临床前查究指引规定汇编，1993：128
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