甘草对老年大鼠CAT、GSH-Px、LPO影响的实验研究


单元:王超(佳木斯大学);包玉双(佳木斯大学);曲凤玉(佳木斯大学);白晶(佳木斯大学)白大芳(佳木斯大学);魏晓东(佳木斯大学)

概要 本测验以Wistar大鼠为研商对象,对大鼠红细胞CAT(过氧化氢酶)活性,全血GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)活性,血浆LPO(过氧化脂质)举办测定。侦察上述目标的随龄改观,甘草对晚年大鼠体内上述目标的影响。结果阐明,大鼠体内的抗氧化酶CAT、GSH-Px活性正在其生长阶段随龄上升(P<0.01),正在衰老阶段随龄降落(P<0.01)。自正在基代谢产品LPO含量正在血浆中随龄填补(P<0.01)甘草水煎剂能普及晚年大鼠全血CAT、GSH-Px活性(P<0.01),低落血浆LPO含量(P<0.01)。差别用药时期(15,30,45d)对上述目标的动态改观无彰着影响(P>0.05)。提示甘草具有抗衰老感化。

很众研商阐明,自正在基毁伤与衰老有亲密联系,自正在基捉拿琨剂或抗氧化剂具有抗衰老感化[1]。很众中草药是强有力的抗氧化剂,如人参、黄芪等,能直接拔除自正在基和普及SOD等抗氧化酶的活性,阐明抗衰老感化[2]。祖国医学以为,甘草性味甘、平、归心、肺、脾、胃经、补脾益气、清热解毒、祛咳止痰、缓急止痛、息争诸药。正在活体状况下,甘草对CAT、GSH-Px、LPO影响尚未有人报道。

每100g甘草,加水适量,浸泡住宿后煎煮,煮沸30min,冷却后,四层纱布过滤,将滤液浓缩至每100ml相当生药1g。

Wistar大鼠:56只,白求恩医科大学测验动物部供应。3~4月龄,165~210g,雄性,为青年组。9~10月龄,250~310,雄性,为中年组。18月龄,350~450g雄性,40只,随机分为5组:15d组,30d组,45d组,比照组,晚年组,每组8只。青年组、中年组、晚年组不加任那边理,喂养1周后,麻醉眶后采血,测定全血CAT、GSH-Px,活性及血浆LPO含量。15d组、30d组、45d组及比照组逐日麻醉灌胃,能药组灌给甘草水煎剂,剂量为10g/kg,比照组灌等量心理盐水。15d组贯串灌胃15d,30d组贯串灌胃30d,45d组与比照组贯串灌胃45d,15d组、30d组、45d组和比照组分辩正在灌胃的第16天,第31天,第46天,麻醉后采血测全血CAT、GSH-Px活性及血浆LPO含量。

RF-5000型荧光光度计,日本产。G-20A高速离心术,湖南离心术厂产。DTNB(5,5-对二硝基苯),Fluka产物,AR。TBA:上海试剂二厂AR。甘草:市售

全血CAT活性:方允中法[3]。全血GSH-Px活性:荣征星法[4]。全血LPO法:大石诚子法[5]。

2.1 大鼠全血CAT活性的随龄改观及甘草水煎剂对晚年大鼠全血CAT活性的影响。与青年组比,中年组CAT活性升高(P<0.01),晚年组活性低落,但无明显性分别(P>0.05)。与中年组比,晚年组活性低落(P<0.01),睹表1。给药后,与比照组比,各测验组CAT活性无明显分别(P>0.05);各测验组间较量,CAT活性也无明显性分别(P>0.05),睹表2。

2.2 大鼠全血GSH-Pc活性的随龄改观及甘草水煎剂对晚年大鼠全血CAT活性的影响。与青年组比,中年组、晚年组的全血GSH-Px活性均升高(P<0.01);与中年组较量,,晚年组的GSH-Px活性低落(P<0.01),睹表1。给药后,与比照组比拟,各测验组全血GSH-Px活性均升高(P<0.01),但各测验组之间无明显性分别(P>0.05),睹表2。

2.3 大鼠血浆LPO含量的随龄改观及甘草水煎剂对晚年大鼠血浆LPO的影响。与青年组比,中年组、晚年组血浆LPO含量升高(P<0.01),与中年组比,晚年组血浆LPO含量升高(P<0.01),睹表1。给药后,与比照组比,各测验组的LPO含量低落(P<0.01);与15d组比,45d组的LPO含量低(P<0.05),睹表2。

CAT可低落生物体内有迫害的H2O2秤谌,以淘汰自正在基和过氧化脂质的天生,与SOD协同感化,使O彻底无毒化。SOD中的Cu2+可被歧化响应产品H2O2还原遗失生机,CAT可拔除H2O2对SOD起珍爱感化,同样,O也可使CAT失活,这两种酶构成互相珍爱的体系,起协同感化。姜招峰报道[6]晚年大鼠血清CAT活性较青年活性明显低落。本测验结果阐明,大鼠全血CAT活性,从中年到晚年大鼠的衰老流程中活性低落。甘草水煎剂对晚年大鼠的全血CAT活性没有明显影响,提示甘草不是通过普及CAT活性来阐明抗衰老感化的。

正在生物体内,GSH-Px和SOD、CAT联合起感化,拔除超氧阴离子O、羟自正在基OH-和过氧化氢H2O2,并可避免O2的发作,减轻和阻断脂质过氧化物的损害,延缓细胞的衰老。文献报道,GSH-Px活性随龄降落,该酶是动物衰老的生化目标之一[7],极少外源性物质,比如硒[8]、Vc[9]、萎蕤[10]、山葡萄[11]不妨普及机体GSH-Px活性,阐明抗衰老感化。本测验结果阐明,GSH-Px活性大鼠的生长阶段随龄上升,正在衰老阶段随龄降落;甘草水煎剂能彰着普及晚年大鼠全血的GSH-Px活性;可是差别给药时期(15、30、45d)对酶活性没有明显性影响。提示,甘草能通过普及GSH-Px活性来抗衰老。

衰老的自正在基学说以为,O的启动自正在基链锁响应,发作毒性更大的OH/H2O2,这些自正在基攻击细胞膜、细胞浆的脂质,使之过氧化,发作过氧化脂质,再攻击卵白质,脂肪酸和核酸等生物大分子,发作脂褐质等晚年色素。普通说来,脂褐质含量是随龄填补的,导致细胞成效降落,构造毁伤,机体衰老。外源性自正在基拔除剂可低落结构LPO含量,阐明抗衰老感化。近年来,极少中草药被证明不妨低落结构LPO含量具有抗衰老感化。本测验结果阐明,大鼠血浆LPO含量是随龄填补的,甘草水煎剂能低落晚年大鼠血浆LPO含量;与给药15d比,给药45d对血浆LPO含量的低落成绩最好。提示甘草具有抗衰老感化,一方面是甘草次酸与甘草黄酮类成份都具有拔除自正在基感化[12];另一边甘草可普及GSH-Px活性,低落LPO含量。

2.丁克祥.抗衰老药对超氧化物歧化酶的感化.晚年学杂志,1990,10(2):112~114

4.荣征星,刘慧中,鲍景奇,等.小鼠全血中谷胱甘肽过氧化物酶生机的微量测定法.生物化学与生物物理学进步,1994,21(4):362~366

7.田清崃,殷莹,李云兰等.谷胱甘肽过氧化物酶和衰老联系的研商.晚年学杂志,1992,12(1):50~52

8.夏敏,白大芳,白书阁.硒对晚年大鼠机体谷胱甘肽过氧化物酶,过氧化脂及其比值的影响.晚年学杂志,1991,11(1):50

9.冯彪,刘亚娟,甘振威等.Ve,Vc对大鼠超氧化物歧化酶和过氧化脂质的影响.晚年学杂志,1993,13(1):175~176

11.刘中申,薛俊玲,张晓强.山葡萄抗衰老感化的开始研商.晚年学杂志,1993,13(3):166~167

12.句海松,李小杰,赵保道,等.阿魏酸钠和18-甘草次酸对氧自正在基的拔除感化.中国药理学报,1990,(5):466~470

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