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研究支链氨基酸(Branched Chain Amino Acid,BCAA)对动物实验性肝损伤的保护作用。方法:采用化学毒物D-氨基半乳糖胺盐酸盐(D-Galn)急性肝损伤模型,四氯化碳(CCl4)急性肝损伤模型,观察支链氨基酸对肝损伤动物生化指标和病理组织学改变的影响。结果:1.支链氨基酸高、低剂量组均对小鼠D-Galn肝损伤ALT及AST增高有明显的降低作用(P<0.01、P<0.05),支链氨基酸+乙肝宁联合用药组比单纯用乙肝宁组降酶作用更强(P<0.01)。病理组织学检查结果:支链氨基酸对D-Galn引起的肝细胞变性、坏死等病变有明显改善作用,与模型组相比,高剂量组改善56.4%,低剂量组改善52%,乙肝宁+氨基酸混合用药组改善更明显为71.6%。2.支链氨基酸高剂量组对大鼠CCl4肝损伤ALT、AST活性增加及胆红素含量增高有明显的降低作用(P<0.01)。病理组织学检查结果:支链氨基酸对CCl4肝损伤引起的肝细胞变性、坏死等病变有明显改善作用,与模型组相比,高剂量组改善27%,乙肝宁+氨基酸混合用药组改善28.2%。结论:支链氨基酸对小鼠D-Galn肝损伤及大鼠CCl4肝损伤具有保护作用。
支链氨基酸(BCAA)由异亮氨酸、亮氨酸及缬氨酸组成。临床上用于改善氨基酸失衡,促进蛋白质合成和减少蛋白质分解,用于肝性脑病的防治[1~3]。并有文献报道,BCAA对大鼠心肌缺血损伤具有一定的防护作用[4];BCAA与复方丹参注射液合用治疗病毒性乙型肝炎、肝硬化腹水、治疗尿毒症能提高疗效[5、6]。本研究采用小鼠D-Galn肝损伤模型和大鼠CCl4肝损伤模型探讨体内补充支链氨基酸以及和其它护肝药合用时是否能减轻动物肝损伤的程度。
支链氨基酸:广州侨光制药厂研制及提供,批号981201;实验时用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水溶液配制成适宜浓度溶液备用。乙肝宁片:青海三普药业公司,批号980318-1;实验时用蒸馏水配制使用。
D-氨基半乳糖胺盐酸盐(D-galactosamine):美国Sigma公司产品,纯度大于99%,批号87H0147;实验时用注射用水配制成水溶液备用。四氯化碳:分析纯,批号971101-22,江苏洪声化工厂产品。谷丙转氨酶试剂盒:批号981004;谷草转氨酶试剂盒:批号980801,上海生物制品研究所产品。
昆明种小鼠,体重18~20g,合格证号26-98A002。SD大鼠,体重150~180g,合格证号26-99A019,均购于中山医科大学实验动物中心。
取健康小鼠72只,随机分成6组,每组12只。给药组分别以支链氨基酸1260mg/kg、420mg/kg、乙肝宁3000mg/kg、混合用药(乙肝宁3000mg/kg+支链氨基酸1260mg/kg),灌胃给药,灌胃容积0.2ml/10g,每日1次,连续7d,模型组和正常组给以等容积的0.5%CMC-Na溶液。模型组和各给药组于实验第7天分别ip D-Galn 800mg/kg,第8天各组断头取血,分别测定ALT活性(赖氏法)、AST活性(赖氏法)。将实验结果进行统计学处理,组间显著性差异采用t检验。并取肝组织作病理组织学检查。
取健康大鼠60只,雌雄各半,随机分成6组,每组10只。给药组分别以支链氨基酸900mg/kg、300mg/kg、乙肝宁2100mg/kg、混合用药(乙肝宁2100mg/kg+支链氨基酸300mg/kg)灌胃给药,灌胃容积1ml/100g,每日1次,连续7d,模型组和正常组给以等容积的0.5%CMC-Na溶液。模型组和各给药组于实验第1、第5天分别s.c纯CCl4 5ml/kg,于实验第8天摘眼球取血,分别测定ALT活性(赖氏法)、AST活性(赖氏法)及胆红素含量(苯甲酸钠-咖啡因比色法)。将实验结果进行统计学处理,组间显著性差异采用t检验。
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