摘要：采用猴头菇、香菇、茯苓3种真菌的众糖等比同化举动总众糖，再按肯定比例配以葡萄籽众酚和甘草酸，制成复合真菌众糖，巡视其抗肿瘤效用成绩以及对荷瘤鼠免疫性能的调整效用。实行以100、200、400mg/kg BW3个剂量(复合众糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)给小鼠灌胃3周后右前腋下接种S-180，赓续灌胃10日后实行。同时设200mg/kg BW的香菇众糖比较组和荷瘤模子比较组，另设平常比较组。结果显示：该复合众糖具有显明的抗肿瘤效用，3个剂量组的抑瘤率别离为37.74%、44.73%、48.32%，一概剂量的复合众糖Ⅱ组的抑瘤成绩显明优于单味香菇众糖。荷瘤鼠L3T4百分率和L3T4/Lyt-2比值显明低重，NK细胞活性、IL-2、IFN-γ的诱生程度明显低于平常小鼠。复合众糖举动免疫巩固剂，可显明普及荷瘤鼠L3T4百分率和L3T4/Lyt-2，对Lyt-2的百分率也有肯定的普及效用，巩固NK细胞活性，激动IL-2、IFN-γ的诱生程度。单味香菇众糖也有肯定改良荷瘤鼠免疫性能的效用，可是不如等剂量复合众糖的成绩显明，佐证分歧出处的抗肿瘤效用有用因素的彼此配伍、彼此协同的主要性。
我国自然植物或中草药中有很众具有抗致突变效用或抗肿瘤效用的物质，这些物质正在人们普通生存中能够获得，无毒性或不易产生毒性，被以为是高效、无毒的潜正在化学戒备剂的最佳出处［1］。目前，相合复方中药或单味真菌众糖抗肿瘤效用机理的探索仍然惹起学者们足够的兴致。本文对局限复合真菌众糖(以下简称复合众糖)抗肿瘤效用作了探索，复合众糖的效用并非是单味众糖因素的简易相加，各因素间存正在着相辅相成、彼此为用的相干，其相加、协同或拮抗效用禁止马虎。鉴于此，本探索抉择猴头菇、香菇、茯苓3种真菌的众糖，配以葡萄籽众酚和甘草酸，制成复合众糖，探索其对荷瘤小鼠的抗肿瘤效用以及对免疫性能的影响，商量其抗肿瘤效用的免疫学机理，并对复合众糖与单味香菇众糖的效用成绩实行了斗劲，为进一步开辟探索癌化学戒备的生物响应调整剂供应参考。
1.1.1动物C57BL/6雄性小鼠，体重(18±2)g，随机分组，每组13只，购自中国医学科学院实行动物核心。
1.1.2复合众糖的制备猴头菇众糖、香菇众糖、茯苓众糖购自南京百兴生物工程有限公司，纯度别离为65%、70%、53%，3种众糖按等比同化后举动总众糖。葡萄籽众酚由中国科学院华南植物探索所供应，白花色素含量大于90%。甘草酸购自内蒙古甘草成品厂，纯度大于90%。将众糖、众酚、甘草酸按肯定的比例同化，制成复合众糖，密闭避光生存待用。
1.2.1实行分组本探索设100、200、400mg/kg BW(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)3个剂量组和香菇众糖(200mg/kg BW)比较组、荷瘤模子组以及平常比较组。灌胃3周后，除平常比较组外，其余5组动物的右前腋下接种5×106个/ml S-180瘤株0.1ml，赓续灌胃10日后实行。
1.2.2脾脏T细胞亚群的检测采用间接免疫荧光单克隆抗体法。离散脾细胞，用淋巴细胞分层液离散，然后调剂细胞浓度为1×106个/ml，别离加到3个试管中，每管1ml，此中一管为空缺比较顾，其余两管别离加100μl的L3T4、Lyt-2单克隆抗体，4℃孵育30min后，用Hanks液洗3遍，插足FITC兔抗鼠IgG100μl，再放入4℃孵育30min后洗3遍，滴片，正在荧光显微镜下计数200个荧光细胞，减去空缺比较顾的荧光细胞后，求出荧光细胞百分率。
由表1可睹，复合众糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组荷瘤动物的瘤重与荷瘤模子组比拟均有显明的压制效用，香菇众糖组亦有显明的压制效用，可是远远不足一概剂量的复合众糖Ⅱ组的效用成绩(P＜0.05)。从抑瘤率的结果来看，也同样注明等剂量的复合众糖Ⅱ组显明优于香菇众糖组。瘤体比的结果显示复合众糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组均显明低于香菇众糖组。
由表2可睹，荷瘤鼠的辅助性T细胞L3T4程度显明低重，压制性T细胞Lyt-2程度亦明显低重，但低重的幅度不如L3T4显明，L3T4／Lyt-2比值极明显低重。复合众糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组以及香菇众糖组均能显明普及L3T4、L3T4/Lyt-2比值，况且复合众糖Ⅱ、Ⅲ组的L3T4程度、L3T4／Lyt-2比值复兴到平常小鼠程度。香菇众糖组也能普及L3T4程度、L3T4/Lyt-2比值，可是显明弱于一概剂量的复合众糖Ⅱ组。复合众糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组以及香菇众糖组对Lyt-2的程度亦有肯定的普及效用，但总体来看变更幅度不如L3T4显明。
由表3可睹，荷瘤鼠的脾细胞转化性能以及NK细胞活性均显明低于平常比较组。复合众糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组以及香菇众糖组均能普及荷瘤鼠的脾细胞转化性能以及NK细胞活性，正在普及NK细胞活性方面，复合众糖Ⅱ组的成绩优于香菇众糖组，复合众糖Ⅲ组的NK细胞活性复兴到平常小鼠程度。
由表4可睹，荷瘤鼠IL-2、IFN-γ的诱生程度均显明低重。复合众糖Ⅲ组能显明普及IL-2诱生程度，可是尚未复兴到平常小鼠程度。复合众糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组以及香菇众糖组均能显明普及IFN-γ的诱生程度，复合众糖Ⅲ组的IFN-γ程度复兴到平常规模。
复合众糖要紧是由3种真菌众糖、葡萄籽众酚以及甘草酸构成。文献报道，分歧出处的众糖对瘤株存正在着分歧水平的压制效用，如猴头菇众糖对脑瘤(B22)、赘瘤(S-180)、肝癌(Hep)的压制效用较显明，而对艾氏腹水癌(EC)不显明［5］；香菇众糖对Hep和B22的效用较显明，而对EC和S-180不显明；甘草酸对S-180有较显明的压制效用，对Hep有肯定的效用，而对B22效用不显明［1，2，6，7］。葡萄子众酚要紧是通过抗氧化和调整机体免疫性能来达成抗肿瘤效用的［4，5］，要紧对Hep、EC有较显明的压制效用，对S-180有肯定的压制效用，而对B22效用不显明［1，4，6］。基于上述成分，本探索采用以分歧出处的众糖为主，佐以具有很强抗氧化效用的葡萄籽众酚和甘草酸，伸张了抗瘤谱，普及了对肿瘤细胞的杀伤、压制效用，有着平常的引申运用前景。本探索通过复合众糖对荷瘤鼠瘤重等影响的阐述，注明固然复合众糖组和单味香菇众糖组对荷瘤的瘤重均有显明的压制效用(如表1)，可是等剂量的复合众糖Ⅱ组效用成绩显明优于香菇众糖组。古代上众采用瘤重来推断抑瘤成绩，可是尚有肯定的单方性，瘤体比既能够响应机体的全身景况，又能反响抑瘤成绩，是巡视抑瘤效用更为客观的目标，从瘤体比的统计阐述结果更能大白地阐发复合众糖组的效用成绩显明优于香菇众糖组，注明各因素间未产生拮抗效用，佐证了各抗肿瘤效用有用因素彼此配伍操纵的主要性。
TH细胞和TS细胞是免疫调整、免疫看守的主旨，两者之间处于彼此限制的平均形态，若TH细胞和TS细胞的数目或性能产生改良，两者间的平均受到败坏，免疫看守性能失调，被以为是肿瘤产生的要紧免疫学机制。TH/TS比值的改良与肿瘤的产生亲密合联，普及TH/TS比值可显明消重肿瘤的产生［7］。L3T4及Lyt-2别离相当于CD4及CD8分子，CD4和CD8别离存正在于诱导-辅助性T细胞(Ti/TH)和压制性T细胞及杀伤性T细胞(TS/TC)外面［6］。本探索发明荷瘤鼠的L3T4和Lyt-2百分率均显明低重，可是Lyt-2低重的幅度比L3T4小，以是，L3T4/Lyt-2比值亦显明低重。赐与复合众糖和香菇众糖后L3T4和Lyt-2百分率均有显明升高。L3T4百分率复兴到平常小鼠程度(睹表2)，香菇众糖组的效用成绩远远不足等剂量的复合众糖Ⅱ组，况且，无论是复合众糖组如故香菇众糖组固然都能普及Lyt-2的百分率，可是幅度不如L3T4显明。以是L3T4/Lyt-2比值显明升高。复合众糖Ⅱ、Ⅲ组的L3T4/Lyt-2比值复兴到平常小鼠程度，注明该复合众糖具有优良的改良荷瘤鼠免疫性能的效用。通过瘤重与L3T4、Lyt-2、L3T4/Lyt-2的合联性阐述发明，瘤重与三者均呈负合联，显示Lyt-2程度的升高也能够压制肿瘤细胞的发展?近年来的探索发明L3T4、Lyt-2细胞亦是不均一的群体，正在L3T4和Lyt-2细胞内均有分歧的表型，Lyt-2细胞内尚有反压制细胞(TCS)，这种细胞劝止TS对TH的压制效用，直接参预杀伤靶细胞［4，7，8］。以是推论，赐与复合众糖和香菇众糖后升高的Lyt-2恐怕是TCS表型，可是，若一味普及Lyt-2程度，以致L3T4/Lyt-2比值低重，倒霉于肿瘤的诊疗，佐证L3T4正在肿瘤免疫中是最为合节的效应细胞［7］。L3T4细胞既能够直接杀伤肿瘤细胞也可与NK细胞协同，普及NK细胞活性，况且诱导IL-2的排泄，普及Mφ的活性，活化其它结构细胞排泄IL-2、IFN-γ等细胞因子，普及机体的具体抗肿瘤才能。本探索的荷瘤鼠NK细胞活性以及IL-2、IFN-γ诱生程度低重，通过赐与复合众糖和香菇众糖后显明普及(睹表3、4)，佐证了上述推论。香菇众糖正在普及荷瘤鼠NK细胞活性方面，远远不足等剂量的复合众糖Ⅱ组显明，进一步证据复合众糖比单味香菇众糖具有更为理思的抗肿瘤效用成绩。
综上所述，本探索证据该复合众糖具有显明的抗肿瘤效用，况且可举动免疫巩固剂普及荷瘤鼠的L3T4百分率以及L3T4/Lyt-2比值；普及NK细胞活性，诱导IL-2、IFN-γ的排泄，改良荷瘤鼠的免疫性能。各抗肿瘤效用有用因素的彼此配伍、彼此协同正在肿瘤药物开辟探索中是很蓄意义的。
1，赵长琦，许有玲，王亚洲.抗肿瘤植物药及其有用因素.北京：中国中医药出书社，1997，138—146
2，杜维霞，刘秀敏，赵乃坤.复方洋参众糖免疫巩固剂对荷瘤和辐射小鼠T细胞亚群的影响.中国实行临床免疫学杂志，1997，9(4)：58—61
3，苏燎原，田海林，徐映东，等.淋巴细胞亚群的NK活性及低剂量辐射对其影响.癌症，1997，16(2)：95—97
6，内田 浩二.食物因素による发癌戒备酵素群の诱导.ガン戒备食物の开辟，1995，37—45
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