肾动脉狭窄型高血压模型在保健食品调节血压功能检测中的应用


摘要为供应新的保健食物效用检测本领,树立肾动脉渺小型高血压大鼠模子。采用二肾一夹法复制肾性高血压大鼠模子,使肾性高血压制模手术组血压均明显升高。服用大蒜制剂后,肾性高血压大鼠血压消重,而对大鼠体重延长值和心率没有昭着影响。结果注解肾动脉渺小型高血压制模本领灵活牢靠,能够运用正在保健食物的效用学评议中。

卫生部于1996年布告了12项保健食物效用学查验本领〔1〕(简称《本领》),但跟着保健食物品种和效用继续推广,原《本领》已不行满意经济成长须要,急需补充很众新的效用检测本领。个中,调度血压也是紧急效用之一。本文试图用肾动脉渺小型高血压大鼠模子对大蒜提取物举行血压调度的心理效用评议。

1.1受试物大蒜制剂,淡黄色稠密液体。人体推举剂量为逐日1.8 g/60 kg BW。本实行设低、中、高三个剂量组,辨别为0.15、0.3、0.9 g/kg BW,相当于人体剂量的5倍、10倍、30倍。另设高血压模子对比组安适常对比组。

1.3东西RBP-Ⅰ型大鼠尾压心率测定仪,由北京中日友爱临床医学探索所坐蓐。U形银夹,内径0.2 mm。

1.4本领肾动脉渺小型高血压模子室温依旧25℃操纵,开启大鼠尾压心率测定仪电源,约30 min后,大鼠固定器和预热箱内温度到达38℃的测试央浼。将平常大鼠若干,逐一放入尾压心率测定仪的恒温箱内,预热10~15 min,次第取出并装入符合的固定网套内,测出苏醒大鼠平常血压值,然后随机分为平常对比组(假手术组)和高血压制模组(手术组)。腹腔打针3%戊巴比妥钠,仰卧位固定,剪去腹部手术野毛,皮肤消毒后于剑突下1.5 cm沿腹正中线切开皮肤及肌层,右食指伸入腹腔摸着左侧肾脏,左食指从腹部外侧配合将肾脏轻轻挤出,用浸有心理盐水的棉花包住,固定于腹外。散开肾蒂筋膜,沿肾静脉下方散开肾动脉。高血压手术组用内径0.2 mm的U形银夹套正在肾动脉上使其渺小,右肾依旧不动。假手术组同样操作,但不套银夹。术后缝合肌肉与皮肤创口,并作消毒看护。4周后测2组大鼠血压,选出第二组中血压升壮伟于4 kPa的大鼠,再分成4组:肾性高血压模子对比组和低、中、高剂量试样组,每组8只。试样组采用灌胃办法,辨别赐与差别剂量试样28 d,平常对比组以蒸馏水灌胃。实行末测5组大鼠的体重、血压和心率。

手术4周后,(2)(3)(4)(5)套U形银夹组的血压明显高于平常对比组(假手术组),阐发肾动脉渺小型高血压模子已获胜树立。服用受试物28 d后,三剂量组血压都有所降落,与高血压模子对比组比拟,中、高剂量组有明显性区别,阐发受试物有昭着的消重高血压的感化(睹表1),也提示本领灵活牢靠。

各组大鼠正在模子树立后,成长情景优越,体重延长(睹表2)和心率(睹表3)均无明显性区别,注解此本领宁静,降血压的同时不影响大鼠的其它心理目标。

正在降压药物探索中,高血压动物模子的树立有众种本领,比方盐性高血压、自觉性高血压(SHR)、神经内排泄型高血压、肾动脉渺小型高血压、肾外包扎型高血压等等。〔2〕而对付保健食物,用何种模子较为符合尚正在寻求中。咱们原委屡屡试验,并与盐性高血压模子对比,以为肾动脉渺小型本领有如下特色:(1)制模道理与临床继发性高血压病人的发病机理一致,即渺小肾动脉可形成肾脏缺血,导致肾脏内肾素酿成,进而增高血中血管重要素的含量,使血压升高〔2〕(2)手术获胜率高,二肾一夹型获胜率为95%。(3)实行本钱比SHR大鼠低,适合于保健食物试样众、动物用量大的特色。(4)盐性模子血压升高不明显,获胜率较低,且停服盐水后,血压不宁静,而肾性模子手术后大鼠血压渐渐升高,到4周后,酿成宁静的高血压,且支撑时代长,更利于保健食物永远服用的特色。

正在衡量血压方面,有尾动脉间接测压法和直接插管测压法两种。〔3〕咱们选用了前者,由于实行中咱们呈现它有两大便宜:(1)衡量简易灵活。采用袖套法阻断鼠尾血流,配以鼠尾容积波的声光显示,能够同时读取血压和心率数据。(2)前者对大鼠无毁伤。尔后者务必先辈作为脉插管手术,动物毁伤告急,不宜永远给样,因而前者更适合保健食物永远灌胃给样的须要。

正在实行流程中,咱们小心到极少影响实行获胜的身分。第一,U形银夹的内径要庄重限制正在0.2~0.25 mm,若肾动脉过分渺小,会形成恶性高血压,大鼠手术后几天内便牺牲。第二,散开肾动脉与肾静脉时,手术难度较大,若刮破肾静脉,会形成大批失血,影响动物存活率。第三,衡量尾压时,要先将大鼠放入38℃预热箱,保温10~15 min,温度差别,血压也有分歧。第四,大鼠不宜正在固定器中闭的时代太长,不然会惹起动物动乱担心,使血压升高。

[1]卫生部卫生监视司编.保健食物治理规则汇编.吉林:吉林科学工夫出书社,1997,41~186

[2]徐叔云,卞如濂,陈修主编.药理实行本领学.第2版.北京:百姓卫生出书社,1994,818~819

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