单元：陈蓉广东省湛江师范学院生物系，湛江，524048；高顺生广东省湛江师范学院体育系；饶颖竹广东省湛江市临床医学琢磨所
摘要目标：探求脑源性神经养分因子对中枢神经体系高级性能勾当的影响机理，为临床使用脑源性神经养分因子调养练习回想困穷疾病供给实习凭据。要领：以小鼠为实习对象,采用练习回想动作锻练和生化测定的要领，参观脑源性神经养分因子对东莨菪碱致练习回想困穷、海马脑区卵白质含量的影响。结果：脑源性神经养分因子能明显地革新东莨菪碱所致的练习回想困穷，使东莨菪碱实习小鼠海马脑区的卵白质含量明显扩大。结论：脑源性神经养分因子对东莨菪碱所致的小鼠练习回想困穷的革新与病愈均具有光鲜影响。
脑源性神经养分因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)是主要的神经发展因子之一，为一种由脑构制合成的小分子碱性卵白质，正在大脑皮层、海马等中枢神经体系部位含量较丰盛，具有鼓吹神经细胞发展、发育，以及神经细胞毁伤后修复等影响〔1～4〕。本琢磨采用练习回想动作锻练与生化测定相团结的要领，参观、阐发BDNF对东莨菪碱(Scopolamine，Scop)所致练习回想困穷的小鼠的练习回想本领和海马脑区卵白质含量的影响，为进一步探求BDNF对练习回想困穷等中枢神经体系疾病的影响机理及临床使用供给实习凭据。
1.1.2药物:Scop由上海禾丰制药厂坐蓐。BDNF从人胚脑提取液中提取，电泳纯。其它试剂均为阐发纯。
1.2.1实习分组:将小鼠随机分为5组：寻常比照组、Scop组〔5〕、Scop+BDNF差别剂量组(0.50mg/公斤体重、1.00mg/公斤体重、1.50mg/公斤体重)，每组10只，牝牡参半。折柳尾静脉打针BDNF，寻常比照组、Scop组赐与等量心理盐水。逐日给药1次，连气儿15日，于第16日劈头举办避暗练习回想动作锻练实习。
1.2.2练习回想动作锻练：锻练采用张家港市教学实习工具厂坐蓐的MG-3型迷宫刺激器。迷宫通道由辐射形的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ臂构成，每臂顶端有一指示灯，指示灯亮，则此臂底部铜棒欠亨电，为安静区，其余两黯淡臂底通电，刺激器担任各通道的通电情景。
锻练前将小鼠放正在通道臂中适当5min，接通电源，调理刺激器随机变换安静区的场所。安静区指示灯亮2s后，要是小鼠仍停息正在黯淡臂或跑入另一黯淡臂，足底即遭电击(电刺激强度为50V)，直到小鼠跑入安静区，电击松手，达成一次练习义务。间隔30s，举办下次锻练。如小鼠由肇始臂直接跑入安静区，为一次无误反响，跑入非安静区，则为一次缺点反响。逐日每只小鼠锻练20次，以练习无误反响率到达100％为学会的法式，记载到达学会法式所需的锻练次数，行动权衡练习本领的目标。正在到达学会法式后，间隔1日，将刺激强度调为0，以同样要领举办回想结果测试，记载20次动作测试中的回想无误反响率，行动权衡回想本领的目标，并将通盘实习数据举办统计学管理。
1.2.3脑卵白含量的测定：正在通盘动作实习终止后，将各组小鼠疾速断头正法，取海马部位折柳称重，列入Tris-HCl缓冲液(pH7.2)研磨匀浆，离心、过滤。采用Lowry法测定海马脑区的卵白质含量。
本琢磨通过动物实习结果讲明，Scop练习回想困穷制型组学会的锻练次数极明显地众于寻常比照组(P<0.01)，回想无误反响率则极明显消重(P<0.01)；尾静脉打针BDNF(0.50mg/公斤体重、1.00mg/公斤体重、1.50mg/公斤体重)的Scop回想困穷组，与Scop组对比，锻练次数明显淘汰(P<0.05)，回想无误反响率明显降低(P<0.05)。结果提示，BDNF可革新Scop所致练习回想困穷，对鼓吹其练习回想本领的复兴均具有光鲜的影响，睹附表。
从附表可睹，与寻常比照组对比，Scop练习回想困穷制型组小鼠海马脑区的卵白含量极明显消重(P<0.01)；正在赐与BDNF后，Scop组实习小鼠海马脑区的卵白含量均明显扩大(P<0.05)。
BDNF是Bardel从哺乳动物脑平分离出来的一种碱性卵白〔6〕。近年来对其氨基酸序列、基因表达和生物活性举办了大批的琢磨〔1～4,7〕，BDNF正在大脑皮层、海马等中枢神经体系部位含量较丰盛，具有鼓吹神经细胞发展、发育，以及神经细胞毁伤后修复等影响。目前尚未睹相合于BDNF对练习回想等中枢神经体系高级性能的影响及机制的报道。为了探求BDNF对小鼠练习回想本领影响的神经机制，为临床使用BDNF调养练习回想困穷疾病供给实习凭据。咱们采用练习回想动作锻练实习，使用能明显消重小鼠练习回想本领的抗胆碱药物Scop树立练习回想困穷模子〔5〕，参观到BDNF能明显革新Scop所致的练习回想困穷，使实习小鼠的练习回想本领取得肯定的复兴。
本琢磨的生化测定结果显示，Scop制型比照组小鼠的海马脑区的卵白质含量明显低于寻常比照组，赐与Scop制型组BDNF后，实习小鼠的海马脑区的卵白质含量光鲜扩大(P<0.05)。海马脑区卵白质合本钱领的崎岖与练习回想有亲切相干〔8～9〕。有报道讲明Scop所致练习回想困穷的机制可以是因为Scop强迫了脑内突触体卵白质的合成，影响神经音信的突触转达，导致小鼠的练习回想本领受到影响〔5〕。结果讲明，BDNF对Scop所致练习回想困穷小鼠的影响可以通过影响抗胆碱药物Scop对突触体卵白质合成的影响，使海马脑区卵白质合成扩大，从而革新了实习小鼠的练习回想困穷，降低了练习回想本领。但BDNF对Scop所致练习回想困穷的革新与病愈影响机理及其量效相干有待进一步琢磨。
3陈蓉.脑源性神经养分因子对体外培植的海马神经细胞的影响琢磨. 湛江师范学院学报,1997,18(2):69.
5章子贵,徐小红,吴馥梅.东莨菪碱所致回想困穷的脑内突触机制. 情绪学报,1998,30(3):332.
8韩怡凡,陈先瑜.中枢胆碱能递质体系与练习回想相干的琢磨.心理科学起色,1983,14(3):216.
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